Hidrojen Peroksiti Düşürme Yeteneklerini Bulmak İçin Bakteriler Üzerinde Katalaz Testi (Şekil ile)
Hidrojen Peroksiti Düşürme Yeteneklerini Bulmak İçin Bakteriler Üzerinde Katalaz Testi (Şekil ile)!
Prensip:
Bazı bakteriler hidrojen kaeroksit (H 2 0 2 ) 'katalaz' enzimini üretebildiklerinden suya (H20) ve oksijeni (0, to) bozma yeteneğine sahiptir.
Hidrojen peroksitin katalaz ile parçalanması, serbest oksijen gazı kabarcıkları (0, ↑) ile gösterilir.
Katalaz testinde, bir test bakteri döngüsü bir slayt üzerinde alınan bir damla hidrojen peroksit içine konur. Bakteri katalaz üretme kabiliyetine sahipse, hidrojen peroksit (H202) su ve oksijene parçalanır. Oksijen üretimi, damlalarda fark edilebilen kabarcıklanma veya köpüklenme ile sonuçlanır.
Gerekli malzemeler:
Slaytlar, bibulous kağıt, aşılama döngüsü, bunsen burner, laminer akış odası, hidrojen peroksit (% 3), izole koloniler veya saf bakteri kültürleri.
Prosedür:
1. Bir musluk musluk suyu altında temizlenir (Şekil 7.18).
2. Sürgü bibulous kağıtla silinir ve havada kurutulur.
3. Slaytın ortasına bir damla hidrojen peroksit (% 3) alınır.
4. Test bakterilerinin bir ilmeği, aseptik olarak, tercihen bir laminar akış odasında, alevle sterilize edilmiş bir ilmek yardımı ile alınır ve slayttaki hidrojen peroksit damlasının içine konur. Her aşılamadan sonra döngü sterilize edilir.
Gözlemler:
1. Damlada kabarcıklanma veya köpük oluşumu meydana gelir: Katalaz pozitif.
2. Damlada kabarcıklanma veya köpük oluşmaz: Katalaz negatif.
Önlemler:
Kan agar besiyerinden bir bakteri kültürü, katalaz içerdiğinden ve her zaman pozitif sonuç verdiğinden, katalaz testi için kullanılamaz. Katalaz negatif bakteriler, ya H 2 0 2 ürettikleri veya havaya ve ışığa maruz kaldıklarında ortamlarda biriktiği için şekersiz ortamlarda ölme eğilimindedir.
Bu nedenle, bu tür bakterilerin stok kültürleri karanlıkta ve havaya erişimin sınırlı olduğu yerlerde saklanmalıdır. Katalaz, aerobik olarak üreyebilen hemen hemen tüm bakterilerde bulunur. Enzim sadece canlı bakteriler tarafından üretildiği için, 24 saatin üzerindeki kültürler katalaz testi için kullanılamaz.
