Şekilini, Boyutunu ve Düzenlemesini Gözlemek için Bakterilerin Temel Boyama İşlemini Yapma Deneyi

Bakterilerin basit temel boyamasını yapmayı, şeklini, boyutunu ve düzenini gözlemlemeyi amaçlar.

Amaç:

Bakterilerin doğal şekli, büyüklüğü ve düzenini temel boyama ile gözlemlemek mümkün değildir, çünkü bu özellikler ısıyla sabitleme ile bozulmuştur.

Ayrıca, bazı bakterilerin (örneğin spirilli) lekelenmesi zordur.

Böylece, negatif boyama aşağıdaki gibi iki nedenden dolayı gerçekleştirilir:

(A) Bakterilerin doğal şekli, büyüklüğü ve düzenini gözlemlemek için burada ısı fiksasyonu yapılmaz.

(B) Lekesi zor olan bakterileri gözlemlemek?

Prensip:

Bakteriler, Na + ve K + gibi katyonlarla çevrili oldukları için yüzeylerinde negatif yük taşırlar (Şekil 5.9). Asidik lekelemede, bir anyonik kromojen (negatif yüklü boya iyonu) ve bir katyona iyonize olan bir asidik boya kullanılır.

Negatif yüklü kromojenler, bakteri hücreleri üzerindeki negatif yüzey yükleri tarafından püskürtüldü, çünkü boya hücreye nüfuz edemez. Şimdi, boyanmamış hücreler renkli arka plana karşı kolayca ayırt edilebilir.

Gerekli malzemeler:

Slaytlar, ilmek, asidik leke (eozin / nigrosin), bakteri et suyu / plaka / meyilli kültürü, mikroskop, daldırma yağı.

Prosedür:

1. Bir musluk, musluk suyu altında düzgün bir şekilde temizlenir, böylece su, yüzeyinde damla olarak kalmaz (Şekil 5.10).

2. Yapışma suyu, bibulöz kağıt ile silinir ve kızak havada kurutulur.

3. Asidin lekesinin küçük bir damlası (nigrosin / eosin) lamın bir ucuna yakın bir yere yerleştirilir.

4. Bir ilmek alev üzerine sterilize edilir ve soğutulur. Aseptik olarak, agar plakası veya eğimli bir bakteri döngüsü veya bir sıvı et suyundan bir bakteri süspansiyonu döngüsü, leke damlasına aktarılır. Leke içindeki bir bakteri süspansiyonu, leke damlasındaki bakteri döngüsünün, damla yayılmayacak şekilde hafifçe karıştırılmasıyla yapılır.

5. Bir başka temiz sürgün, ilk sürgüye 30 ° 'lik bir açıyla tutulur, öyle ki, bir önceki dar bir kenar leke damlası olmadan bir sonrakinin yüzeyine temas eder.

6. Bu eğimli konumda, ikinci slayt, kenarı damlaya değene ve damla kenarı boyunca yayılana kadar leke damlaına doğru ileri çekilir.

7. Eğimli konumda, ikinci slayt ince bir bakteri bulaşması oluşturmak için geriye doğru itilir.

8. Leke havada kurutulur. Isı tespiti burada yapılmaz.

9. Lam, mikroskop aşamasına kırpılır ve düşük güç ve yüksek kuru hedefler altında gözlemlenen yayma.

10. Leke üzerine bir damla daldırma yağı konur.

11. Leke, yağa batırma hedefi altında gözlenir.

Gözlemler (Yağa Daldırma Hedefinde):

1. Bakterilerin Şekli:

Küresel (coccus)

Çubuk şeklindeki (basil)

Virgül benzeri (vibrio)

Spiral (spiroketler)

2. Bakterilerin düzenlenmesi:

Çiftler (diplobacillus / diplococcus)

Dört ayaklı (tetrads)

Zincirlerde (streptococcus / streptobacillus)

Üzüm benzeri kümeler (staphylococcus)

Cuboidal (sarcinae veya octet)

3. bakteri boyutu:

Göz tahmini ile, alanın içine daldırma hedefi çizerek yapın.