Islak Bakteriler Dağının Doğal Halini ve Boyutunu Gözlemlemek İçin Hazırlanması

Doğal halini, büyüklüğünü ve yaşam koşullarındaki düzenini gözlemlemek için ıslak bakteri montajını hazırlamayı hedefleyin.

Amaç:

Bakteriler, lekelerle renklendiklerinde kolayca ve net bir şekilde görülebilmektedir, ancak boyama işlemlerinin çoğunda, hücreler, ısı fiksasyonunun yanı sıra kimyasallara (lekeler, asit ve alkol).

Bu deneyin amacı, canlı halindeki bakterilerin doğal şekli, büyüklüğü ve düzenini gözlemlemektir. Hücreler slayt ve kapak kayması arasında bastırıldığı için ıslak montajda hareketlilik gözlenemez.

Prensip:

Islak montajda, bir bakteri süspansiyonunun bir damlası, bir sürgü üzerine yerleştirilir, bir kapak kayma ile örtülür ve bir bileşik mikroskop altında veya tercihen yağ daldırma hedefi kullanılarak bir karanlık alan veya faz kontrast mikroskobu altında gözlenir.

Gerekli malzemeler:

Cam slayt, kapak kayma, petrol jeli, daldırma yağı (sedir yün yağı veya sıvı parafin), bakteri kültürü (katı ortamda veya sıvı süspansiyonda), halka ve mikroskop (bileşik, karanlık alan veya faz kontrastı).

Prosedür:

1. Bir musluk, musluk suyu altında düzgün bir şekilde temizlenir, böylece su, yüzeyinde damla olarak kalmaz (Şekil 5.2).

2. Sürgü, bibulous kağıt ile silinerek ve ardından alev üzerinde hareket edilerek veya güneşte tutularak kurutulur.

3. Bakteriler katı bir ortamda büyütülmüşse (eğik kültür veya plaka kültürü olarak), lamın ortasına bir damla damıtılmış su konur. Bir döngü bir alev üzerinde kırmızı sıcak bir sıcaklığa ısıtılarak sterilize edilir. Oda sıcaklığına soğutulur. Daha sonra, aseptik olarak bakteri kültürünün küçük bir kısmı ilmek tarafından kazınır ve su damlasına aktarılır.

Bir bakteri süspansiyonu, su damlasındaki bakteri ilmeğinin, damla yayılmayacak şekilde hafifçe karıştırılmasıyla yapılır. Süspansiyon halinde bir sıvı ortamda büyütülürse, aseptik olarak bir damla bakteri süspansiyonunun bir damlası alevle sterilize edilmiş bir ilmek kullanılarak doğrudan lamın ortasına yerleştirilir.

4. Damlayı çevreleyen petrol jölesi veya benzeri bir malzeme uygulanır, böylece kapak kayması damlayı kapladığında buharlaşma ve hava akımının etkisi en aza indirilir.

5. Bir kapak kayması, bakteri süspansiyonunun damlasının yanında, bir kenarı slayta dokunacak şekilde meyilli bir pozisyonda tutulur.

6. Kapak kayması yavaşça, düşme yüzeyine değene kadar alçaltılır.

7. Ardından, kapak kayması serbest bırakılır, böylece bakteri süspansiyonu damlası, kapak kaymasının altında her yöne yayılır. Süspansiyonda hava kabarcığı oluşmamasına özen gösterilmelidir.

8. Lam, bileşik bir mikroskop sahnesinde kırpılır ve düşük güç ve yüksek kuru hedefler kullanılarak gözlenir. Daha sonra, kapak kaymağına bir damla daldırma yağı damlatılır ve mikroskobun yağ daldırma amacı kullanılarak gözlemlenir. Tercihen, net bir gözlem için bir faz kontrastı veya karanlık alan mikroskobu kullanılmalıdır.

Gözlemler (Yağa Daldırma Hedefinde):

1. Bakterilerin Şekli:

Küresel (coccus)

Çubuk şeklindeki (basil)

2. Bakterilerin düzenlenmesi:

Virgül benzeri (vibrio)

Spiral (spiroketler)

Çiftler (diplobacillus / diplococcus)

Dört ayaklı (tetrads)

Zincirlerde (streptococcus / streptobacillus)

Üzüm benzeri kümeler (staphylococcus)

Cuboidal (sarcinae veya octet)

3. bakteri boyutu:

Göz tahmini ile, alanın içine daldırma hedefi çizerek yapın.