2 Serum Proteinlerin Elektroforez Yöntemleri (Figürlü)

Serumda çok sayıda protein vardır. 1937'de Arne W Tiselius, farklı proteinlerin elektrik alanında ayrılma yöntemini tanıttı.

Elektroforezde, proteinler elektriksel bir alanda ayrılır. Daha sonra kâğıt veya selüloz asetatta zon elektroforezi gelişti. 1952'de elektroforezi immünodifüzyon ile birleştiren iki aşamalı bir yöntem geliştirildi. Daha sonra, C Williams, P Graber ve M Poulik, klasik İmmunoelektroforez yöntemini tanıttı (burada hem elektroforez hem de çift immünodifüzyon, aynı ağar kaplı slaytta gerçekleştirilir).

1. Bölge Elektroforezi:

Proteinler, yüzey elektrik yükleri temelinde ayrılabilir. Ayırma için kâğıt, selüloz asetat veya agar benzeri bir atıl destekleyici ortam kullanılır. Serum örneği destekleyici ortama yerleştirilir. Destekleyici ortam daha sonra elektroforez aparatının pozitif ve negatif kutuplarına bağlanır. Elektrik alanı altında, proteinler yüklenir ve destekleyici ortam boyunca hareket eder. Hareketleri elektriksel yüklerine bağlıdır.

Farklı protein molekülleri farklı yüklere sahip olduklarından, destekleyici ortamda farklı pozisyonlara hareket ederler. Genellikle elektroforez 60-120 dakika veya daha uzun bir süre boyunca gerçekleştirilir. Daha sonra proteinler görsel olarak lekelenir ve incelenir veya bir dansitometrede taranır. Ayrılmış ve lekeli protein fraksiyonlarının densitometre taraması, her bandı, desene kendi karakteristik zirvesine dönüştürür ve her protein fraksiyonunun nicelleştirilmesine yardımcı olur.

2. Serum Protein Elektroforezi:

Normal insan serumu beş ana elektroforetik gruba ayrılır: albümin, a1-globulin, a2-globülin, β-globülin ve y-globülin (Şekil 27.5).

Bölge elektroforezi bazı insan hastalıklarının tanısında yararlıdır:

Şekil 27.5A ila C:

Selüloz asetat şeridi üzerinde elektroforez ve selüloz asetat kağıt şeridinin densitometre taraması: A ve A1: Boyama (A) ve selüloz asetat şeridinden (A1) densitometre taramasından sonra görüntülenen hücresel asetat şeridinde normal serum protein bantları.

B ve B1: Hipergamaglobulinemi

C ve C1: Hipogamaglobülinemi

ben. Multipl miyelom ve Waldenstrom'un makro-globulinemi. Bu hastalıklarda, elektroforetik olarak kısıtlanmış bir protein spike genellikle glo-globulin bölgesinde ortaya çıkar. Başak, monoklonal bir immünoglobülin birikimini temsil eder. Monoklonal immünoglobülinin tanımlı bir yüzey yükü vardır ve bu nedenle bir başak üretilir (oysa normal poliklonal immünoglobulin paterni y-globulin bölgesinde smear üretir).

ii. Hipogamaglobülinemi (serum gama globülinde belirgin azalma).

iii. Hipoproteinemi (tüm serum proteinlerinde belirgin azalma).

iv. Hipoalbüminemya:

Karaciğer ve böbrek hastalıklarının çoğunda meydana gelen albüminde azalma.

v. İdrarın elektroforezi, Bence-Jones proteini gibi serbest immünoglobulin hafif zincirlerinin tespitinde yardımcı olur.

vi. Beyin omurilik sıvısının (BOS) zon elektroforezi, multipl skleroz ve diğer merkezi sinir sistemi bozukluklarının tanısında yardımcı olur. Serum protein elektroforezi, protein anormalliklerinin tespiti için bir tarama testi olarak kabul edilir. Özel anormallikleri bulmak için daha fazla analiz yapılması gerekir.