Coomb Testinin Klinik Uygunluğu (Antiglobulin Testi)

Coombs'un testi basit ve zekice bir tekniktir. Coombs testi ilk kez 1908'de Moreschi tarafından tanımlanmış ve daha sonra kırmızı kan hücresi antijenlerine aglütre edici olmayan antikorlar göstermek için 1945'de RR Coombs ve iş arkadaşları tarafından yeniden keşfedilmiştir.

(Antikorlar, 'aglütleştirici olmayan' antikorlar olarak adlandırılır, çünkü antikorlar, RBC'ler üzerindeki antijenlerle bağlanmalarına rağmen aglütinasyona neden olamaz. Antikorlar ayrıca, antikorlara neden olmadığından, "eksik antikorlar" olarak da adlandırılır. aglütinasyon, ancak antikor molekülünün yapısında eksiklik yoktur.)

Aglütleştirici olmayan antikorlar, aslında, RBC'lerin yüzeyindeki antijenlere bağlanır. Ancak RBC'lerin beklenen topaklaşması oluşmuyor. RBC'ye bağlı antikora karşı başka bir antikor (anti-antikor veya antiglobulin olarak adlandırılır) eklendiğinde, aglütinasyon meydana gelir. Antikorlar, RBC'ye bağlı antikorların Fc bölgelerine bağlanır ve aglütinasyona yol açan bir kafes oluşturur. Test, antiglobulin testi veya Coombs testi olarak adlandırılır.

İki tür anti-globulin testi vardır:

1. Doğrudan anti-globulin testi (DAT)

2. Dolaylı anti-globulin testi (lAT)

1. Doğrudan anti-globulin testi (DAT), in vivo olarak RBC'lere bağlı antikoru tespit etmek için kullanılır.

Bir hastanın yıkanmış RBC'leri anti-globülin ile karıştırılır.

↓

Anti-globülinler, RBC'lerin yüzeyindeki aglütleştirici olmayan antikorlara bağlanır ve görünür aglütinasyona neden olur. Test sonucu DAT pozitiftir (Şekil 16.6).

Bu nedenle pozitif bir DAT, hastanın RBC'lerinin aglütre edici olmayan antikorlarla kaplandığını ve hastanın DAT pozitif olduğunu söyler.

ben. Pozitif DAT, yenidoğanın hemolitik hastalığı olan RBC'lerde görülür (HDN'nin RBC'leri anti-Rh antikorları ile kaplanır).

ii. Şu anda, DAT, RBC'lerin yüzeyine bağlanan IgG antikorlarını ve C3b'yi tespit etmek için kullanılmaktadır. Hemoliz ile başvuran hastalarda, DAT testi hemolizin immün etiyoloji olup olmadığını belirlemede faydalıdır.

Şekil 16.6: Coomb'un doğrudan aglütinasyon testi (DAT).

DAT, RBC'lerin yüzeyine bağlı aglütleştirici olmayan antikorların varlığını tespit etmek için kullanılır. A. Bireyin yıkanmış RBC'leri, anti-globulin reaktifi ile karıştırılır. Anti-globülinler, RBC'ye bağlı antikorların Fc bölgelerine bağlanır ve görünür aglütinasyona neden olur ve bireyin DAT pozitif olduğu söylenir. B. Eğer RBC'ler antikorlarla kaplanmazsa, aglütinasyon olmayacak ve bireyin DAT negatif olduğu söylenir. DAT ayrıca yenidoğanın hemolitik hastalığından muzdarip olduğundan şüphelenilen yenidoğanın anti-Rh antikoru kaplı RBC'lerinin varlığını tespit etmek için kullanılır

ben. Bağışık olmayan hemoliz nedenleri [yayılmış intravasküler pıhtılaşma, kırmızı hücreli enzim eksiklikleri [örneğin glikoz-6-fosfat dehidrojenaz eksikliği (G6PD eksikliği), kırmızı hücre zarı defektleri (kalıtsal sferositoz, PNH gibi) ve hemoglobinopatiler (örneğin orak hücreli anemi, talasemi)] DAT negatiftir.

ii. Hemolizin immün nedenleri (otoimmün hemolitik anemi, ilaca bağlı hemoliz, hemolitik transfüzyon reaksiyonları gibi) DAT pozitiftir.

iii. Soğuk otoantikorları, paroksismal soğuk hemoglobinüre hastalarında ve bazı ilaç kaynaklı hemolitik anemilerde yalnız C3'e bağlı pozitif bir DAT görülür.

2. Dolaylı aglütinasyon testi (IAT), bir hastanın serumunda RBC'lere karşı bağlanmamış antikorların varlığını tespit etmek için kullanılır.

ben. Annenin serumunda anti-Rh antikorlarını saptamak için IAT:

Annenin serumu Rh pozitif O kan grubu RBC'leri ile inkübe edilir. Anti-Rh antikorları annenin serumunda mevcutsa, antikorlar RBC'lere bağlanır. RBC'ler daha sonra yıkanır.

↓

Daha sonra anti-globulin reaktifi eklenir.

↓

Anti-Rh antikorları annenin serumunda mevcutsa, RBC'ler aglütine olur ve test IAT için pozitif olur.

ii. Kan transfüzyonu sırasında bir alıcının serumundaki donör RBC'lerine karşı antikorları saptamak için IAT:

IAT testi, vericinin RBC'leriyle reaksiyona girebilecek alıcıdaki antikorların varlığını saptamak için vericinin RBC'lerinin alıcının serumuyla çapraz eşleşmesinde (kan transfüzyonundan önce) yaygın olarak kullanılır.

Vericinin RBC'lerini yıkayın.

↓

Alıcının serumunu RBC'lere ekleyin ve 37 ° C'de 30 dakika inkübe edin.

↓

RBC'leri yıka.

↓

Anti-globulin reaktifini ekleyin.

Aglütinasyonun geliştirilmesi, alıcının serumunun donör RBC'lerine karşı antikorlara sahip olduğunu ve testin antikorlar için pozitif olarak rapor edildiğini gösterir. Pozitif bir IAT sonucu, önerilen donör kanının söz konusu alıcıya aktarılmaması gerektiğini gösterir.

Mevcut anti-globülin test reaktifi (ayrıca Coombs reaktifi olarak da adlandırılır) preparatları, insan IgG ve C3b'ye karşı yönlendirilen bir 'kokteyl' monoklonal antikoru içerir (aglütleştirici olmayan antikorların RBC'lere bağlanması, komponent sistemini C3b fragmanlarının birikmesine neden olan kompleman sistemini aktive eder. RBC'ler ve dolayısıyla antikorlardan ayrı olarak, RBC'ler ayrıca C3b fragmanları ile kaplanırlar).